Media yang digunakan untuk pengujian potensi antimikroba

Percobaan V dan VI

Uji Aktivitas Anti Mikroba Pada Media Cair DanMedia Padat

I. Tujuan

Mengetahui aktivitas anti mikroba pada media padat dan media cair.

II. Dasar Teori

Pengukuran aktivitas secara mikrobiologi dapat dilakukan dengan beberapa cara,antara lain :1)Metode DilusiAda dua macam metode dilusi yaitu metode dilusi cair (Metode

 Macro Broth Dillution

) dan metode dilusi padat (Metode agar dilusi). Pada dilusi cair, masing-masing konsentrasi obat ditambah suspensi bakteri, sedangkan dalam dilusi padat tiapkonsentrasi dicampur dengan media agar lalu ditanam bakteri, diinkubasi selama 24 jam. Kegunaan dari metode dilusi ini adalah untuk mencari KHM (Kadar HambatMinimum) yaitu kadar obat terendah yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri.Kadar terkecil yang menunjukkan hambatan terhadap pertumbuhan bakteri ditandaioleh kejernihan media merupakan KHM. Data sifat kimia fisika dan data aktivitasantibakteri (KHM) dianalisis secara statistik dengan uji regresi liner dan non linier .2)Metode Difusia)Cara Kirby Bauer Beberapa koloni kuman dari pertumbuhan 24 jam pada agar diambil,disuspensikan ke dalam 0,5 ml BHI cair, diinkubasikan 4–8 jam pada 37°C. Suspensiditambah aquadest steril hingga kekeruhan tertentu sesuai dengan standar konsentrasi bakteri 10

8

CFU per ml. Kapas lidi dicelupkan dalam suspensi bakteri lalu ditekan-tekan pada permukaan media agar selanjutnya diletakkan kertas samir (disk) yangmengandung antibiotik di atasnya, diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. b)Cara SumuranSeperti cara Kirby Bauer, setelah dioleskan bakteri pada media agar dibuatsumuran dengan garis tengah tertentu dan ke dalam sumuran diberi larutan antibakteridan diinkubasikan pada suhu 37

°

C selama 18-24 jam.c)Poor PlateDiambil suspensi bakteri satu ose dimasukkan ke dalam 4 ml agar base 1,5% yangmempunyai temperatur 50

o

C setelah suspensi homogen dituang pada media Mueller hinton ditunggu sebentar sampai agar tersebut membeku, diletakkan disk diatas